زیست شناسی لونزا ، کیت lonza

 

آزمایش اندوتوکسین نمونه های مبتنی بر خون

همانطور که می گویند ، خون ضخیم تر از آب است و در آزمایش اندوتوکسین می توانید این را به معنای واقعی کلمه استفاده کنید.

بر خلاف آب ، نمونه های مبتنی بر خون حاوی بسیاری از اجزاء می باشند که در آزمایش های تشخیص اندوتوکسین تداخل دارند

و آنها را به یکی از دشوارترین انواع نمونه برای آزمایش تبدیل می کنند.

خون کاملاً تداخل دارد ، بنابراین اغلب به جای آن از سرم و یا پلاسما استفاده می شود.

پروتئین های خون مثل آلبومی  از عوامل دخالت گسترده ای هستند که امکان دارد هر اندوتوکسین موجود در نمونه را پوشانده باشند.

برای آزاد کردن اندوتوکسین متصل به این پروتئین ها و همینطور غیرفعال کردن پروتئازهایی که امان دارد وجود داشته باشد ،

ممکن است عملیات حرارتی انجام شود.

یکی دیگر از عوامل دخالت کننده بالقوه ضد انعقاد دهنده ها (بعنوان مثال هپارین) است که امکان دارد در آماده سازی خون شما وجود داشته باشد.

آنها برای جلوگیری از لخته شدن خون مورد استفاده قرار می گیرند ، اما متأسفانه در آنزیم های LAL  دخالت می کنند.

ضد انعقادها به عنوان شلات دهنده عمل می کنند و کاتیون های دوقلوی را که برای عملکرد آنزیم های LAL ضروری هستند ، به وجود می آورند.

اضافه کردن راه حل MgCl2 می تواند بر این مشکل غلبه کند.

 

 

اتصال اندوتوکسین به انواع مختلف پلاستیک

دستورالعمل FDA  آزمایش پیروژن و اندوتوکسین

سؤال ها و پاسخ ها نشان می دهد که توانایی تشخیص اندوتوکسین می تواند توسط ذخیره و استفاده از نمونه تحت تأثیر قرار بگیرد.

از آنجا که مولکول های اندوتوکسین به سطوح جذب می شوند ، نوع ظرف نمونه کاملاً مرتبط می باشد.

بنابراین محققان بازیابی کنترل استاندارد (Endotoxin (CSE از ظروف سفت و سخت ساخته شده از

پلی استایرن ، پلی کربنات ، پلی پروپیلن و پلی اتیلن ترفتالات (PETG) را در چهار نقطه زمانی مختلف در ۲۴ ساعت انجام دادند.

ظروف نمونه پر از WFI ، تا ۳۷ درجه سانتیگراد گرم شده و به مدت ۶۰ دقیقه در دمای محیط استخراج شد.

مایع استخراج با استفاده از روش LAL توربیدیمتریک جنبشی جمع شده و آزمایش شده است.

نویسندگان نتیجه می گیرند که ظروف جمع آوری پلی کربنات یا پلی استایرن برای دقیق ترین نتایج آزمایش اندوتوکسین

وقتی آزمایش در ۶ ساعت از زمان نمونه برداری انجام می شود ، پیشنهاد می شود.

پلی استایرن كلی به عنوان بازیافت نمونه جمع آوری نمونه برای کیت سنجش اندوتوكسین به علت بازیابی نسبتاً زیاد

و ثبات آن در طول زمان پیشنهاد شده است.

با این وجود ، از آنجا که در بهبود اندوتوکسین بین اکثر مواد بین ۱ تا ۶ ساعت پس از تلقیح تغییر قابل توجهی وجود دارد ،

آنها توصیه می کنند که آزمایش اندوتوکسین را در اسرع وقت پس از نمونه گیری انجام دهید ، ترجیحاً در مدت ۱ ساعت از جمع آوری نمونه.

 

بانی کیمیا اولین وارد کننده کیت lonza و کیت اندوتکسین در ایران می باشد.

زیست شناسی لونزا